益心解毒方对NOX2亚基和NOX4亚基过表达及小干扰RNA引起的心肌细胞还原型辅酶Ⅱ氧化酶活性变化的机制研究.pdf

GP国??医?
中医?中西医结合研究
益心解毒方对NOX2亚基和NOX4亚基过表达及
小干扰RNA引起的心肌细胞还原型辅酶Ⅱ
氧化酶活性变化的机制研究
解华,麻春杰,郭淑贞,付帮泽,冯玄超,王伟
摘要】目的观察益心解毒方含药血清对NOX2、NOX4亚基过表达和小干扰RNA(RNAi)导致的H9C2心
肌细胞还原型辅酶Ⅱ( NADPH)氧化酶活性的变化,探讨益心解毒方的作用机制。方法采用正常雄性
Sprague- Dawley大泉16只,构建针对NOX2、NOX4亚基的过表达质粒和RNAi质粒。采用转染试剂瞬时转染H9C2心
肌细胞,沆式细胞术检测转染率,转染24h后分组(正常H9C2细胞组、过表达组、H9C2转阴性対照质粒组、RNAi
质粒组、益心解毒方高荆量组、益心解毒方中剂量组、益心解毒方低剂量组)给予不同荆量的含药血清千预,24h后
检测 NADPH氧化酶活性。结果转染NOX2亚基过表达质粒的各组 NADPH氧化酶活性比较,差异有统计学意义(P
<0.05)。其中,过表达组、益心解毒方高荆量组、益心解毒方低剂量组与正常H9C2细胞组 NADPH氧化酶活性比较
差异有统计学意义(P<0.05);H9C2转阴性对照质粒组、RNAi质粒组、益心解毒方中荆量组与过表达组銀 NADPH氧
化酶活性比較,差异有統计学意义(P<0.05);RNAi质粒組、益心解毒方高剂量组、益心解毒方低剂量组与H9C2转
阴性对照质粒组 NADPH氧化酶活性比较,差异有统计学意义(P<0.05);益心解毒方高剂量组、益心解毒方低剂量
组与RNAi质粒组 NADPH氧化酶活性比较,羞异有统计学意义(P<0.05);益心解毒方中剂量组与益心解毒方高判量
组 NADPH氧化酶活性比较,差异有统计学意义(P<0.05);益心解毒方低剂量组与益心解毒方中剂量组 NADPHI氧化
酶活性比较,差异有统计学意义(P<0.05)。转染NOX4亚基过表达质粒的各组 NADPEI氧化酶活性比较,差异有统
计学意义(P<0.05)。其中,过表达组、益心解毒方高剤量組、益心解毒方低剂量组与正常H9C2细胞组 NADPH氧
化酶活性此較,羞异有统计学意义(P<0.05);H9c2转阴性对照质粒组、RNAi质粒组、益心解毒方中剂量组、益心
解毒方低剂量组与过表达组 NADPHI氧化酶活性比较,差异有统计学意义(P<0.05);RNAi质粒组、益心解毒方高剂
量组、益心解毒方低剂量組与H9C2转阴性対照质粒组 NADPH氧化酶活性比較,差异有統计学意义(P<0.05);益
心解毒方高剂量组、益心解毒方低剂量组与RNAi质粒组 VADPHI氧化酶活性比較,差异有统计学意义(P<0.05);益
心解毒方中剂量组与益心解毒方高剂量组 NADPEI氧化酶活性比较,差异有统计学意义(P<0.05);益心解毒方低剂
量组与益心解毒方中剂量组 NADPH氧化酶活性比較,差异有统计学意义(P<0.05)。结论NOX2、NOX4亚基的过
表达可以提高 NADPH氧化酶活性,而RNAi表达可以沉默NOX2、NOX4亚基,从而降低 NADPH氧化酶活性,益心解
毒方不会直接影响 NADPH氧化酶活性。实验研究表明干预和抑制NOX2、NOX4亚基的 NADPHI氧化酶活性调控环节,
降低心肌活性氧(ROS)水平,保护心肌细胞,改善心功能,可能是益心解毒方发挥药效的重要机制
关键词】益心解毒方;肌细胞,心脏;基因表达;小干扰RNA;氧化还原酶类
【中图分类号】R542.2【文献标识码】Adoi:10.3969/jiss1007-9572.2015.30.020
解华,麻春杰,郭淑贞,等.益心解轟方对NOX2亚基和NOX4亚基过表达及小干扰RNA引起的心肌细胞还原型
辅酶Ⅱ氧化晦活性变化的机制研究[J].中国全科医学,2015,18(30):3727-3731.[ww. chinagp.net
Xie H, Ma Guo Z, et al. Mechanism of Yixin Jiedu formula on the overexpression of NOX2 and NOX4 and the
myocardial NADPH I oxidase activity changes induced by RNAI J] Chinese General Practice, 2015, 18(30): 3727
3731.
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81102839);科技部重大新药创制(2012ZX09103-201-011);北京中医药大学自主选
题(2015-JYBー JSMSO12)
作者单位:10009北京市,北京中医药大学(解华,郭淑贞,付帮泽,冯玄超,王伟);内蒙古医科大学(麻春杰)
通信作者:王伟,10009北京市,北京中医药大学;E-mail:wangwei26960@126.com