QBT 2409-1998 化妆品中氨基酸含量的测定.pdf

QB/T2409-1998
前
言
本标准是按GB/T1.1-1993《标准化工作导则第1单元:标准的起草与表述规则第1部分:标
准编写的基本规定》进行编写。
本标准是根据氨基酸在一定pH条件下,与茚三反应生成蓝紫色化合物进行比色定量原理而制
定的。
本标准由国家轻工业局行业管理司提出
本标准由全国化妆品标准化中心归口。
本标准起草单位:上海市日用化学工业研究所。
本标准主要起草人:甘平平、孔佳华、潘海燕、汤智凌
中华人民共和国轻工行业标准
QB/T2409-1998
化妆品中氨基酸含?的测定
1范围
本标准规定了化妆品中氨基酸含量的茚三比色测定法。
本标准适用于化枚品中蛋白质及其水解液、氨基酸含量的测定。
本方法最小检测浓度为0.01%。
2引用标准
下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时,所示版本均
为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。
GB/T8170-1987数值修约规则
原理
蛋白质物质经水解成氨基酸,而氨基酸在一定的pH条件下,与茚三酮反应生成蓝紫色化合物,对
其进行比色定量测定,从而计算出相应的氨基酸含量。
4试剂
分析中应使用分析纯(AR)试剂,试验用水应为蒸馏水或纯度相当的水。
4.12%茚三溶液
称取茚三(HG3-984)1.0g,溶于一定量热水中,待冷却后定容至50mL。该溶液每隔(2~3)天器
重新配制。
4.2磷酸盐绥冲溶液pH=8.04)
4.2.11/15mol/L磷酸二氢钾溶液
称取磷酸二氢钾(GB/T1274)9.070g,溶于水中后定容至
4.2.21/15mol/L磷酸氢二钠溶液
称取礫酸氢二钠(CB/T1263)23.876g,溶于水中后定容至1L
4.2.3取4.2.1溶液5.0mL于100mL.容量瓶中,用4.2.2溶液稀释至刻度,摇匀。
4.3盐酸(GB/T622)6mol/L溶液
4.4氨基酸标准溶液(200pg/mL)
准确称取白氨酸(L- Leucine含量不小于98%)0.2000g,用水溶解并定容至100mL,摇匀后再吸取
10mL于100mL容量瓶中加水稀释至刻度。
4.5蜡块
蜂蜡与石蜡之比为1:9
5位器
5.1分光光度计:波长范围400nm~700nma。
国琼轻工业局1998-11-25批准
1999-06-01实施
QB/T2409-1998
5.2酸度计:分度值0.02。
5.3电磁搅拌器。
5.4容量瓶:100,1000m。
5.5移液管:1,2,5,10mL
5.6水浴锅
5.7试管:30ram×200mm。
5.8分析天平:分度值0.0001g。
5.9刻度试管:25,100mL
5.10烧杯:l00mL
6测定步景
6.1标准曲线的绘制
准确移取氨基酸标准溶液0,0,0.2,0.4,0.6,0.8,1,0ml(相当于氨基酸0,40,80,120,160,200g)
分别置于25mL刻度试管中,加水补究至4mL,然后各加入2%茚三開溶液和酸盐冲溶液各1mL,
摇匀。置沸水浴中加热15min,取出冷却至室温,加水至刻度,摇匀。静置15min,用分光光度计在570nm
波长下以水作参比,用1cm比色皿测定试液的吸光度,绘制吸光度对氢基酸含量(g)的标准曲线。
6.2样品前处理
准确称取样品约5g(准确至0.001g)于试管,加入6mol/L盐酸溶液约10mL~20mL于沸水浴中水
解约6h(对乳化体可先将试样置于沸水浴中破乳1h~2h)。加入约1g~2g蜡块约30min后,取出试管
冷却。去除蜡块,将溶液移至100mL烧杯中,在酸度计上用液调节pH至7.5~8.0,再将溶液移入
100mL容量瓶中并加水稀释至刻度,摇匀待用。
6.3测定
移取试液(6.2)1mL~4mL置于25mL刻度试管中,以下按6.1测定步骤进行。测得吸光度,通过标
准曲线计算氨基酸的含量,同时做一空白样。
7结果示
样品中氨基酸含量(以白氨酸计)按式(1)进行计算:
氨基酸含量(%)=
CーC)×10
m×106
100………(1)
式中:C1ー从标准曲线上查得样品的氨基酸的量,g1
C。从标准曲线上查得空白样的数值,g;
Vー一移取样品溶液的,mL
样品量,g。
所得结果按GB/T8170修约用两位小数表示。
8精密度
两次平行测定结果之差应不大于其平均值的10%。