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实用医学杂志2014年第30卷第11期
基础研究
髓源性抑制细胞对脓毒症小鼠的保护作用
胡晓光童荔刘勇军曹璐朱艳平管向东蔡常洁
摘要目的:研究髓源性抑制细胞( MDSCS)对脓毒症小鼠是否有保护作用。方法:米用育肠结扎穿孔术
(CLP)制作脓毒症小鼠模型,术后不同时间点检测 MDSCS在脾脏中的变化。通过CLP术后腹腔注射 MDSCS,
观察脓毒症小鼠症因子及生存率的变化。结果:随着脓毒症的进展, MIDSCS在脓毒症小鼠脾脏中不断聚
集,可増加抗炎因子(IL-10)的产生,减少炭定因子(INF-Y)的释放,从而改善脓毒症的预后。结论: MDSCS可
以减轻脓毒症的炎症反应,提高脓毒症小鼠的生存率,从而为治疔脓毒症提供新的思路。
关键词脓毒症;髓源性抑制细胞;炎症反应
Protective effect of myeloid-derived suppressor cells in mice with sepsis Auxiao-guang, O G Li, LI
Yong-jun, CAO Lu, HU Ya-ping, GUAN Xing-dong, A Chang-jie Surgery Intensie Care Unit(SU), the
First Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou 510080, Cha
CorrespondingauthorCA1ChangjieE-mail:13570097848@163.com
(Abstract) Objective To investigate whether myeloid-derived suppressor cells(MDSCS) have a protective
effect in septic mice. Methods The model of caecal ligation and puncture (CLP) was performed to induce
olymicrobial sepsis in mice. The changes of MDSCS in spleens at different times after operation were studied. In
order to observe the influence of MDSCS on the inflammatory factors and survival of septic mice, MDSCS were
injected into the peritoneal cavities of mice after CIP. Results MDSCS accumulated in spleens of septic mice
progressively. MDSCS could increase anti-inflammatory cytokine production, decrease the level of inflamma
factors, and improve the survival rate of mice with sepsis. Conclusion MDSCS can attenuate the inflammation and
improve the survival rate of mice with sepsis, suggesting thal intraperitoneal injection of MDSCS may provide a new
direction for the treatment of sepsis
Key words) Sepsis; Myeloid-derived suppressor cells; Inflammation
髓源性抑制细胞( myeloid- derived suppressor
材料与方法
cell, MDSCS)是一群分化不完全、具有免疫抑制功1.1材料6~8周雄性 BALB/e小鼠,体质量18
能的细胞群体,包括不同分化阶段的巨噬细胞、粒~25g,购于广东省医学实验动物中心。 CDIIB-PE
细胞以及树突状细胞等?。在小鼠体内,具有免疫 Rat Anli- Mouse、Ly-6G和Iy-6C- FITC Rat Anti- Mouse、
抑制功能的CDI1bCR1细胞被称为 MDSCS3。有CBA试剂盒均购于美国BD公司。
关 MDSCS的研究最早来源于胂瘤模型,但在自身1.,2模型制作CLP模型制作参考 Rittirsch等8
免疫性疾病、病毒或寄生虫感染以及脓毒症?报道的方法。为了更接近临床和提高CLP术后小
等急慢性炎症中均有大量的 MDSCS聚集。目前,鼠的生存率,术后予1mL37℃生理盐水进行液体
MDSCS对脓毒症病理生理过程影响的作用机制及复苏,体温复苏和应用抗生素,即术后2和24h分
对脓毒症预后的影响尚未明确。本实验采用盲肠结別予腹腔注射亚胺培南西司他丁钠(25mgN、必
扎穿孔术( caecal ligation and puncture,CIP)制作对照组为假手术组(即未行CLP)。术后8d,CLP
脓毒症模型,旨在探讨 MDSCS对脓毒症小鼠炎症死亡率稳定在40%~50%之间而对照组的死亡率
反应过稈及预后的影响,为脓毒症细胞治疗提供新为0%则认为CLP模型稳定。
的思路。
1.3脾脏单个核细胞的分离于CLP术后第10
天分离小鼠脾脏,研磨后用5 ml PRMI1640培养液
冲洗,转移至15mL离心管中,250g离心5min,芥
doi:10.3969/ J. lssn.1006-5725.201-4.L1.03
上清液;加人红细胞裂解液3mL,混匀孵育5min,
基金项目:国家自然科学基金项日(编号8071530:国家自250g离心5min,弃上清液;加入RPMI1640培养
然科学基金青午科学基金项目(编号:81201452);广东省自然科学
基金项目(编号:S201201000104;S201301001586)
基混匀,调整细胞浓度,以备用。
作者单位:510080广州市,中山大学附属第一医院SICU
1.4分选 MDSCS取1.3中得到的脾脏单个核细
通信作者:蔡常洁E-mail:1357009848@163.com
胞,加入抗体CD1Ib- PE Rat Anti- Mouse(1puL/10