1,5-二咖啡酰奎宁酸在肾上腺嗜铬细胞瘤细胞缺血再灌注损伤中的作用.pdf

广东医学2012年7月第33卷第14期 Guangdong Medical Journal Jul,2012,Vol.33,No.14
2045
1,5-二咖啡跣奎宁酸在肾上腺嗜铬细胞瘤细胞
缺血再灌注损伤中的作用
张莹,付学军,卢艺,邹良玉,曹旭,晓凡?
暨南大学第二临床医学院、广东省深圳市人民医院神经内科(518020)
【摘要】目的研究1,5-二咖啡酰査宁酸(1,5- DICQA)对缺血再灌注诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞痛细胞
(PC12细胞)损伤是否有保护作用。方法用缺糖缺氧4h/复氧24h处理PC12细胞作为PC12细胞缺血再灌注的
体外模型,实验分为4组:空白对照组、J1,5- DICQA(50wml/I)对照组、缺血再灌注組、1,-dCQA(50umo/L)+
缺血再灌注銀。应用酶标仪测定各组细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放量,荧光显微镜观察并测定细胞内活性氧簇
(ROS)含量、线粒体膜电位水平。结果PC12细胞经缺血再灌注损伤后,与空白对照组比较,细胞DH释放量
及ROS含量显著增加(P<0.05),线粒体膜电位显著下降(P<0.05);i1,5-dCQA+缺血再灌注组与缺血再灌注
组比较,细胞LDH释放量及ROS含量明显降低(P<0.05),线粒体膜电位显著升高(P<0.05);1,5- DICQA对照
组与空白对照组比较,以上3项指标姜异无统计学意义(P>0.05)。结论1,5- DICQA通过减轻氧化应激、保护
线粒体功能,减轻缺血再灌注诱导的PCI2细胞损伤。
关键词】1,5-二咖啡酰奎宁酸;PC12细胞;缺血再灌注;乳酸脱氪酶;活性氧簇;线粒体膜电位
The protective effects of 1, 5-dicqa on PC12 cells with Ogdreperfusion induced injury. ZHANG Ying, FU
Xue-jun, LU Yi, ZOU Liang-yu, CAO Xu, CHU Xiao-fan. Departme of Neurology, Second Clinical College ofjinan
University, Shenshen Peoples Hospital, Shenzhen 518020, Chin
Corresponding author: CHU Xiao-fan
I Abstract Objective To evaluate the protective effects of 1, 5-DICQA on PC12 cell with OGD/reperfusion
induced injury. Methods The OG/reperfusion model was constructed with 4 hours of OGD followed with 12 hours of
reoxygenation in PC12 cells in vitro. The cels were divided into 4 groups: )blank control group, ii)I, 5-DICQAA(50
UM )group, i)OGD/reperfusion group, and iv) 1, 5-DICQA(50 UM) +OGD/reperfusion group. The release of LDH
was measured by ELISA, while the ROS content as well as MMP level were assessed by fluorescence microscope. Results
Significant ncrease of LDH and ROS with reduction in MMP was revealed in OGD/reperfusion group when comparin
ith those in blank control group(P<0.05), which was signicantly reversed y 1, -ICQA50M) treatment(P<
0.05). Conclusion 1, 5-DICQA can mitigate te OGD/reperfusion-induced injury to PC12 cells via alleviating oxida-
tive stress and protecting mitochondrial function
Key words] 1, 5-dicqa; PC12 cell; OGD/reperfusion; LDH; ROS; MMP
二咖啡酰奎宁酸( dicaffeoylquinic acids,DCQ)是中保护作用。
药制剂灯盏细辛中咖啡酸酯的主要成分,有1,5-二
材料与方法
咖啡酰奎宁酸(1,5- dicaffeoylquinic acids,1,5-diC-1.1细胞PC2细胞由中科院深圳先进技术研究院
QA)、3,5-二咖啡酰奎宁酸(3,5- dicaffeoylquinic赠予。
acids)等多种同分异构体,各种同分异构体之间的药理1.2药物与试剂小牛血清、DMEM高糖培养基、
作用或有所区别。近年来,随着各种色谱分离技术的DMEM无糖培养基、。0.25%EDTA一胰酶 I'rypsir/ED-
发展,人们对植物中的DCQ的药物化学、药理作用进 TA, PBS缓冲液购于美国 Gibco公司;活性氧簇(ROS
行了深人的研究,发现其具有抗氧化、抗微生物等多种检测试剂盒、线粒体膜电位检测试剂盒、乳酸脱氢酶
作用2。作为DCQ的单体之一,1,5- DICQA是否能(LDH)测定试剂盒购于南京建成生物工程研究所;ニ
减轻神经细胞缺血性损伤目前尚鲜见报道,2010年8甲基亚砜( Dimethyl sulphoxide)购自美国 AMRESCS
月至201年2月本实验研究1,5- DICQA对缺血再灌1.5- DICQA由云南生物谷灯盏花医药有限公司赠予;
YE( oxygen-glucose deprivation/ reperfusion, OGD/R)s
其余试剂如乙醇、多聚甲醛等为国产分析纯。
致的肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC2细胞)损伤是否有1.3主要仅器生物净化工作台(BCM-1000型,苏
州净化设备有限公司);可控温式CO2增湿培养箱
*国家自然科学基金资助项目(编号:30971024),广东省自然科学( AUTOFLOW R WATERー JACKETED CO2 INCUBA-
基金资助项目(编号;91510515010000,广东省深圳市科技计划项TOR,美国);电热恒温鼓风于燥箱(DHG-9146A型,
?(编号:201002004)
上海精宏实验设备有限公司);立式压力蒸汽灭菌器
△通信作者
YXQ-IS-SⅡ,上海博迅实业有限公司医疗设备