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免疫组织化学染色技术
法医学院
官大威
第一节常规组织学染色技术概述
宏观→微观→超微结构→基因水平
组织形态学研究技术的种类
病理大体组织标本的染色方法
在标本制作中,为了某种特殊目的,突出显示标
本的重要部分,借助组织切片的特殊染色方法对标本
进行染色,将病变器官及不同组织成分用染料染成不
同的颜色,以便于区分大体标本的不同成分和病变特
如:
脂肪组织染色法
目的:主要用于心、肝、肾脂肪变性,动脉粥样
硬化大体标本的染色
试剂:苏丹Ⅱ或苏丹IV
结果:病变处脂肪组织呈橙黄色
>早期心肌梗死染色法
目的:显示早期心肌梗死的区域
试剂:0.1%NBT(硝基四唑蓝)/0.2mol/LPBS
(pH7.6)
方法:将2-3mm厚新鲜心肌大片放入试剂中,37°C
孵育20min
结果:正常心肌呈蓝色,早期心肌梗死区、纤维结缔
组织、瘢痕组织呈浅蓝色或不显色
注意:新鲜标本,尸检心肌不超过6小时
光学显微镜下的组织学染色方法
常规HE染色( hematoxylin and eosin staining
组织学特殊染色
1. Mallory三染色、 Masson三染色
2.神经纤维的镀银染色
3.其他的特殊染色,包括钙、铁、铅
铜、黑色素和脂褐素、细胞DNA和
RNA的染色等
上述的各种染色方法只能在细胞水平上显示组织结构的
形态改变。
超微结构的观
线波长的限制,光学显微镜的分辨率极限为0.2um
有效放大倍数最高不超过200倍。
电镜的分辨率最佳可达0.14nm,放大倍率最高可达100万倍。
第二节免疫组织化学染色技术
Immunohistochemical technique
由于该技术主要是用于研究和观察细胞中的某些
结构或分子物质和组织细胞间的成分,因此现又称为
免疫细胞化学技术。
根据标记物的不同,免疫细胞化学技术可分为
1.免疫荧光细胞化学技术
2.免疫酶细胞化学技术
3.免疫铁蛋白技术
4.兔疫金-银细胞化学技术
5.免疫电子显微镜技术