DB4113_T 057-2024 奶山羊鲜精人工授精技术规范.pdf

ICS 65.020.30 CCS B 40 4113 南阳市地方标准 DB 4113/T 0572024 奶山羊鲜精人工授精技术规范 2024-02-01 发布 2024-03-05 实施 南阳市市场监督管理局 发 布 DB 4113/T 0572024 I 目次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 种公羊配种前的准备.1 5 人工授精站的设备条件.2 6 人工授精前的准备.2 7 采精.3 8 精液品质检查.3 9 精液的稀释.4 10 精液保存、运输.4 11 输精.4 12 记录工作.4 附录 A（资料性）常温保存稀释液配方.6 附录 B（资料性）种公羊精液品质检查登记表.7 附录 C（资料性）母羊输精记录登记表.8 DB 4113/T 0572024 II 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由南阳市农业农村局提出并归口。本文件起草单位：河南健羊牧业有限公司、西北农林科技大学、河南牧业经济学院、西峡县农业农村局。本文件主要起草人：闫志浩、余世锋、史怀平、袁慧、田中、赵娟、朱春梅、王晓琳、赵毅、刘莹、杜翼虎、李君、杨春侠、杨方外、刘晓、隋元成、杜明、齐宝其、李娜、刘玉林、陈良松。DB 4113/T 0572024 1 奶山羊鲜精人工授精技术规范 1 范围 本文件规定了奶山羊人工授精技术中人工授精站的设备及条件、种公羊配种前的准备，人工授精过程中采精、精液品质检查、稀释、输精及其精液保存运输。本文件适用于奶山羊鲜精人工授精技术操作。2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。射精量 每次采精所采得的种公羊精液量，单位为mL。精子密度 每mL精液中精子数量。有效精子数 有效精子数=精子密度精子活力输精剂量。精子活力 在37条件下直线前进运动精子数占总精子数的百分率。精子畸形率 畸形精子占视野中总精子数的百分率。4 种公羊配种前的准备 种公羊选择 人工授精用的种公羊经综合鉴定，均应达到一级以上，符合种用标准。种公羊的等级一般应高于母羊的等级。青年公羊调教 对于初次用于配种的青年种公羊，须经调教，使其习惯于假阴道采精。DB 4113/T 0572024 2 种公羊采精训练 种公羊在配种前三周应开始采精，第一周可隔三日采采精一次，第二周隔二日采精一次，第三周隔一日采精一次，以提高种公羊的性欲和精液品质。5 人工授精站的设备条件 人工授精操作室 5.1.1 采精室和输精室 面积为1012。要求地面平整，光线充足，室内应有12个输精架。5.1.2 精液处理室 面积为810。要求屋顶、墙壁、地面平整。室温应保持在20左右。种公羊舍 环境干燥，小圈舍10 左右，饲养2-3只种公羊，并有1520的运动场。待配母羊舍 应与输精室相连通，其面积可根据母羊群大小来决定。6 人工授精前的准备 精液稀释液的配制 6.1.1 现用稀释液 取自产羔2周以上的健康母羊的新鲜奶，经水浴（9495）/消毒15min，降温至3540，去除表面奶皮后，加入青毒素1000IU/mL和链霉素1000IU/mL。6.1.2 常温保存稀释液 稀释液配方见附表A。药液的配制 6.2.1 酒精及酒精棉球。6.2.2 0.35新洁尔灭溶液。6.2.3 润滑剂：取白色医用凡士林二份和液体石蜡油一份混合。6.2.4 生理盐水棉球。人工授精器械的洗涤 6.3.1 人工授精所用器械在每次用完以后，均应彻底洗涤干净，特别是假阴道内胎的油渍及输精器内残留的精液，最后再经清水和蒸馏水各冲洗一次，保持清洁、干燥，存放于具有消毒功能的干燥箱内。6.3.2 假阴道内胎、玻璃棒、温度计、金属镊子需用 75%酒精棉球擦拭消毒。6.3.3 集精杯、稀释液、生理盐水棉球、毛巾、纱布、保存运输精液用的玻璃容器需采用高压蒸馏消DB 4113/T 0572024 3 毒，115消毒 30min。6.3.4 输精器需经高压蒸汽消毒。当连续给多只母羊输精时，每使用一次，输精器的前段需用 75%酒精棉球由前向后擦拭消毒，切勿将酒精挤入输精器内，待酒精干燥后，再用生理盐水棉球擦拭，方可用于另一只母羊输精。6.3.5 每次使用的开膣器用新洁尔灭（37）溶液清洗干净，之后用生理盐水棉球擦拭，再供另一只母羊输精使用。6.3.6 凡是接触精液的器械，如假阴道内胎、集精杯、输精枪、保存运输精液用的容器均应严格消毒，用经灭菌的稀释液冲洗两次，以保持精子的适宜环境。7 采精 种公羊与台羊的准备 7.1.1 采精之前，用温热湿毛巾将种公羊阴茎包皮周围擦拭干净。7.1.2 选择发情的健康母羊作为台羊，或利用假台羊采精，台羊外阴部应经擦拭消毒，种公羊爬跨以便假阴道采精。假阴道的准备 假阴道夹层内注入5055、150mL180mL温水。层内注入适量空气，以使假阴道采精口形成三角形。用经过消毒的温度计检测假阴道内腔温度，以达到3942为宜。用玻璃棒蘸取润滑剂，涂抹于假阴道内胎前二分之一段。采精操作 采精员蹲于台羊右侧，右手持假阴道与地面成3540度夹角，紧靠于台羊臀部，当种公羊爬跨于台羊背上并伸出阴茎时，采精员用左手轻握阴茎包皮，将阴茎导入假阴道内。采精完毕后，立即将假阴道竖起，排除空气，取下集精杯，盖上集精杯盖，送往精液处理室。采精频率 种公羊每天采精12次。每次采精后应间隔4h，再进行第二次采精。8 精液品质检查 精液的感官检查 正常精液为白色或乳黄色，呈云雾状，无味或略带腥味。凡带有腐败臭味，出现红色、褐色及绿色的精液均不可用于输精。精液的显微镜检查 8.2.1 密度、活力 8.2.1.1 在显微镜 200400 倍下观察，一般采用 10 级评分方法评定精子活力，以呈直线前进运动的精子数占全部精子的百分率来评定。如果 100%的精子呈直线运动评为 1.0；90%的精子呈直线运动评为0.9，依此类推。如果精子回旋运动记以“旋”，而呈摆动的精子应记以“摆”；如果全部精子不活动则记以“死”。新鲜精液精子活力一般在 0.70.8。DB 4113/T 0572024 4 8.2.1.2 在 100 倍显微镜视野内布满密集的精子，精子间空隙很小，很难分清单个精子的活动情况的精液定为“密”级；如果精子间空隙相当于 12 个精子的长度定为“中”级；如果显微镜视野内精子稀疏地散在视野中，精子间空隙很大，彼此间距在 3 个精子以上的长度，定为“稀”级。8.2.2 精子数 在显微镜下用血球计数板准确地计算出每毫升精液的精子数。通常每次射精量精子总数为15亿60亿。9 精液的稀释 鲜精通常利用羊奶、生理盐水或稀释液(附录A）进行稀释，比例为1：（24）倍为宜。调整稀释液的温度应与原精液温度相同，稀释时应将稀释液缓慢地注入原精液，避免精子伤害。精液稀释后，评定精子活力，以检验稀释效果。10 精液保存、运输 精液保存 集精杯作好标记，注明种公羊号、采精时间、密度、稀释倍数、精液量及其活力。长途运输精液的保温瓶周围放置冰水袋，使精液低温保持在25。精液瓶需用纱布或棉套包裹，使精液温度缓慢下降，并稳妥安置于保温瓶内。精液运输 精液在运输过程中，严防剧烈振荡，并尽可能缩短途中运输时间。精液送达输精点，输精时再从保温瓶中取出，在室温下使精液温度升高至1825，然后放入3537温水中升温。经运输和保存的精液，需再经精液品质检查合格后，方能用于输精。11 输精 母羊输精准备 母羊经发情鉴定及健康检查后，才允许给予输精。母羊输精前，外阴部应清洗干净，以0.35新洁尔灭溶液或酒精棉球擦拭消毒，等干燥后，再用生理盐水棉球擦拭。输精操作 将经过消毒的开膣器轻缓地插入母羊阴道，打开阴道后，寻找子宫颈外口，再将输精器缓慢插入子宫颈外口内，深度0.5cm1.0cm。每头份的输精量，原精液0.05 mL0.1mL，稀释后精液0.1 mL0.2mL。每头份输精量中直线前进运动的精子数不少于7000万个，精子活力达0.7以上。母羊输精次数，可采用一次试情，两次输精，即早晨试情一次，发情母羊即当时给予输精，下午再输精一次。第二天下午再试情，如果羊继续发情，可再行输精一次。输精器及开膣器在每只母羊使用后，须经消毒才允许为另一只母羊输精。输精母羊须作好记录，并给予标记，便于识别。12 记录工作 DB 4113/T 0572024 5 人工授精站及输精点做好种公羊采精记录及母羊配种繁殖记录，记录表见附录B和附录C。各项记录必须准确，并定期进行统计分析。DB 4113/T 0572024 6 A A 附录A （资料性）常温保存稀释液配方 常温保存稀释液配方见表A.1、A.2。表A.1 常温保存稀释液配方一 成分及单位 用量 脱脂羊奶/mL 100 青霉素/IU 100000 链霉素/IU 100000 表A.2 常温保存稀释液配方二 成分及单位 用量 蒸馏水/mL 100 Tris/g 4 果糖/g 2 柠檬酸钠/g 1.4 卵黄/mL 25 青霉素/IU 100000 DB 4113/T 0572024 7 B B 附录B （资料性）种公羊精液品质检查登记表 种公羊精液品质检查登记表见表B.1。表B.1 种公羊精液品质检查登记表 采精日期 种公羊号 采精员 采精量/mL 颜色 气味 pH 活力 精子密度亿/mL 畸形精子率（%）总精子数/亿 稀释后总量/mL 稀释液量/mL 头份数 检验员 备 注 DB 4113/T 0572024 8 C C 附录C （资料性）母羊输精记录登记表 母羊输精记录登记表见表C.1。表C.1 母羊输精记录登记表 母羊号 胎次 发情 日期 第一次输精 第二次输精 第三次输精 预产期 输精员 种公 羊号 输精 时间 精液 倒流 种公 羊号 输精 时间 精液 倒流 种公 羊号 输精 时间 精液 倒流